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abbexa abx585151說明書

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abbexa abx585151說明書

人 Isthmin 1 (ISM1) ELISA 試劑盒

貨號: abx585151


Human Isthmin 1 (ISM1) ELISA Kit 是一種 ELISA 試劑盒,用于體外定量測量血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解物、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物體液中的 Human Isthmin 1 (ISM1) 濃度。

介紹Isthmin 1 (ISM1) 是一種抑制新血管形成的蛋白質。在非洲爪蟾中發(fā)現(xiàn),ISM1 預計具有與血管生成和胚胎發(fā)育相關的功能。目前沒有與這種蛋白質密切相關的疾病。
目標地峽 1 (ISM1)
反應性人類
測試應用酶聯(lián)免疫吸附試驗
推薦稀釋最佳稀釋度/濃度應由最終用戶確定。
貯存在 4 °C 下運輸。收到后,按照套件手冊中的存放說明存放套件。
有效性該套件的有效期為 6 個月。
穩(wěn)定試劑盒的穩(wěn)定性取決于活性損失率。在適當?shù)膬Υ鏃l件下,保質期內損失率小于5%。為了盡量減少性能波動,應嚴格控制操作程序和實驗室條件。還強烈建議整個測定由同一用戶自始至終執(zhí)行。
測試范圍0.156 納克/毫升 - 10 納克/毫升
靈敏度< 0.07 納克/毫升
標準格式凍干
檢測方法比色法
檢測類型三明治
檢測數(shù)據(jù)定量的
樣品類型血清、血漿、組織勻漿、細胞裂解物、細胞培養(yǎng)上清液和其他生物液體。
目標類型抗原
測定原理該試劑盒基于夾心酶聯(lián)免疫吸附測定技術。將抗體預涂在 96 孔板上。將標準品、測試樣品和生物素結合試劑添加到孔中并孵育。然后加入 HRP 偶聯(lián)試劑,并孵育整個板。在每個階段使用洗滌緩沖液去除未結合的結合物。TMB 底物用于量化 HRP 酶促反應。加入 TMB 底物后,只有含有足夠 ISM1 的孔才會產生藍色產物,然后在加入酸性終止溶液后變?yōu)辄S色。黃色的強度與板上的 ISM1 量成正比。光密度 (OD) 在酶標儀中以 450 nm 分光光度計測量,從中可以計算 ISM1 的濃度。
套件組件列出的套件組件僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 預涂層 96 孔微孔板

  • 標準

  • 標準稀釋緩沖液

  • 洗滌緩沖液

  • 檢測試劑A

  • 檢測試劑B

  • 稀釋劑 A

  • 稀釋劑 B

  • TMB基板

  • 停止解決方案

  • 封板機

需要但未提供的材料
  • 37°C 培養(yǎng)箱

  • 多通道和單通道移液器和無菌移液器吸頭

  • 噴瓶或自動微孔板清洗機

  • 1.5 毫升試管

  • 蒸餾水

  • 吸水濾紙

  • 100 毫升和 1 升量筒

  • 酶標儀(波長:450 nm)

  • ELISA 搖床

試劑制備此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 1) 標準品:用推薦體積的標準稀釋緩沖液配制標準品,制成標準溶液。然后按照協(xié)議中的說明,使用標準稀釋緩沖液對標準溶液進行系列稀釋。

  • 2) 洗滌緩沖液:按照方案中的說明,用蒸餾水稀釋濃縮的洗滌緩沖液。

  • 3) 檢測試劑制備:計算所需工作溶液的總體積。分別用稀釋劑 A 和稀釋劑 B 以 1:100 稀釋檢測試劑 A 和檢測試劑 B。

檢測程序此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 1) 設置標準、測試樣品和對照孔。

  • 2) 將 100 µl 稀釋標準品分裝到標準孔中。

  • 3) 將 100 µl 標準稀釋緩沖液分裝到對照(零)孔中。

  • 4) 將 100 µl 稀釋樣品分裝到樣品孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時。

  • 5) 將 100 µl 檢測試劑 A 分裝到每個孔中。在 37 °C 下孵育 1 小時。

  • 6) 洗滌 3 次。

  • 7) 將 100 µl 檢測試劑 B 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 8)洗滌5次。

  • 9) 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。

  • 10) 分裝 50 µl 終止液。

  • 11) 在 450 nm 處測量 OD。

協(xié)議此過程僅供參考。產品手冊可能略有不同。產品應按照隨附的產品手冊中的說明使用,并與產品一起交付。
  • 使用前將套件組件和樣品平衡至室溫 (18 - 25 °C)。建議為每個測試繪制標準曲線。

  • 1. 在預涂板上分別設置標準孔、測試樣品孔和對照(零)孔,然后記錄它們的位置。建議至少測量每個標準和樣品一式兩份。

  • 2. 將 100 µL 每個標準品、質控品和樣品加入適當?shù)目字小S蒙w子密封板并在 37°C 下孵育 1 小時。

  • 3. 取下蓋子并丟棄液體。

  • 4. 每孔加入 100 µl 檢測試劑 A 工作溶液。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 1 小時。

  • 5. 取下蓋子并丟棄溶液。用 1X 洗滌緩沖液洗滌板 3 次。

  • 6. 每孔加入 100 µL 檢測試劑 B 工作溶液,密封并在 37°C 下孵育 30 分鐘。

  • 7. 棄去溶液并用洗滌緩沖液洗滌板 5 次,如上一步所述。

  • 8. 將 90 µl TMB Substrate 分裝到每個孔中。用蓋子密封板并在 37°C 下孵育 10-20 分鐘。避免暴露在光線下。孵育時間僅供參考,最佳時間應由最終用戶確定。不要超過 30 分鐘。

  • 9. 每孔加入 50 µL 終止液。立即在 450 nm 處讀取。

結果計算為了計算,平均每個參考標準和每個樣品的 OD450 重復讀數(shù),并減去平均對照(零)OD450 讀數(shù)。標準曲線可以繪制為每個參考標準溶液的相對 OD450 [Y] 與每個標準溶液的相應濃度 (X)。樣品的 ISM1 濃度可以從標準曲線中插值。
分析精度Intra-assay Precision (Precision within an assay):在一個板上分別測試了 3 個具有低、中和高水平 Isthmin 1 (ISM1) 的樣品 20 次。
測定間精密度(測定之間的精密度):在 3 個不同的板上測試了 3 個具有低、中和高水平的 Isthmin 1 (ISM1) 的樣品,每個板重復 8 次。
CV (%) = (標準偏差/平均值) × 100
測定內:CV<10%
測定間:CV<12%
可用性5-7 個工作日內發(fā)貨。
筆記本產品僅供研究使用。范圍和靈敏度可能會發(fā)生變化。請聯(lián)系我們獲取最新的產品信息。為了獲得準確的結果,樣品濃度必須稀釋至試劑盒的中間范圍。如果您需要特定范圍,請?zhí)崆奥?lián)系我們或在您的訂單評論中寫下您的要求。請注意,我們的 ELISA 和 CLIA 試劑盒針對天然樣品而非重組蛋白的檢測進行了優(yōu)化。我們無法保證檢測到重組蛋白,因為它們可能具有與天然蛋白不同的序列或三級結構。
標準100 納克/毫升








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